РАЗРАБОТКА РЕКОМБИНАНТНЫХ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ КОНТРОЛЕЙ ПЦР ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ STAPHYLOCOCCUS AUREUS И STREPTOCOCCUS AGALACTIAE В МОЛОЧНОЙ ПРОДУКЦИИ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИХ ЛОКУСОВ АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНОСТИ

2023

Closed access Metadata (CSL-JSON)
DOI 10.52578/2305-9397-2023-2-2-144-153
Data confidence 70 medium
How this score is calculated

It is built from checkable properties of the record itself: whether the article has a DOI, how many independent sources confirmed its data, whether the required fields are filled in, and how recent the latest confirmation is. Disagreement between sources and a missing identifier lower it. A value of 80 or above means the record was published without further checking; 60 to 79 means it is published at reduced confidence, with a manual check advisable. A record verified by an editor by hand is never pushed below 90 by a recalculation. This scores our data about the article, not the article itself.

Abstract

В статье представлены результаты конструирования рекомбинантных положительных контрольных образцов, путем клонирования в плазмидные вектора pTG19-T фрагментов генов DQ507382.1; U58139.2, MF095627.1, HF679144.1, HF679144.1, AB368369.1, KX687892.1, MG786937.1. Данные гены несут специфические фрагменты последовательностей для S. aureus: гена термостабильной нуклеазы (nuc); генов резистентности к антибиотикам группы бета-лактамов (blaZ), макролидов (ermC) и тетрациклинов (tetK); а также для Str. agalactiae: гена, кодирующего глюкозокиназу (glck) и генов резистентности к антибиотикам группы бета-лактамов (pbp), макролидов (erm), тетрациклинов (tetM). Плазмиды с фрагментами генов успешно выявлялись с помощью ПЦР, это подтверждает, что все интересующие последовательности были правильно лигированы в плазмидные векторы и могут быть использованы в качестве положительных контрольных образцов. Разработанные положительные контроли показывают правильное протекание полимеразной цепной реакции, качественность реагентов, используемых в эксперименте, оптимальность температурно-временных режимов и отсутствие ингибиторов ПЦР. Исследование выполнено в рамках Научно-технической программы BR10764944 «Разработка методов аналитического контроля и проведения мониторинга безопасности пищевой продукции» на 2021-2023 годы.