Аңдатпа
В статье представлены результаты конструирования рекомбинантных положительных контрольных образцов, путем клонирования в плазмидные вектора pTG19-T фрагментов генов DQ507382.1; U58139.2, MF095627.1, HF679144.1, HF679144.1, AB368369.1, KX687892.1, MG786937.1. Данные гены несут специфические фрагменты последовательностей для S. aureus: гена термостабильной нуклеазы (nuc); генов резистентности к антибиотикам группы бета-лактамов (blaZ), макролидов (ermC) и тетрациклинов (tetK); а также для Str. agalactiae: гена, кодирующего глюкозокиназу (glck) и генов резистентности к антибиотикам группы бета-лактамов (pbp), макролидов (erm), тетрациклинов (tetM). Плазмиды с фрагментами генов успешно выявлялись с помощью ПЦР, это подтверждает, что все интересующие последовательности были правильно лигированы в плазмидные векторы и могут быть использованы в качестве положительных контрольных образцов. Разработанные положительные контроли показывают правильное протекание полимеразной цепной реакции, качественность реагентов, используемых в эксперименте, оптимальность температурно-временных режимов и отсутствие ингибиторов ПЦР. Исследование выполнено в рамках Научно-технической программы BR10764944 «Разработка методов аналитического контроля и проведения мониторинга безопасности пищевой продукции» на 2021-2023 годы.