Abstract
Микоплазмы выступают как в роли секундарной микрофлоры, присоединяясь к патологическому процессу, вызванному другими микроорганизмами, так и в качестве первичных этиологических агентов на фоне ослабления общей резистентности организма животного. Вследствие широкого разнообразия микоплазменных патогенов, особенно актуальным становится своевременное выявление и видовое определение микоплазм вовлеченных в патологический процесс. В этой ситуации важным моментом является наличие у ветеринарных лабораторных специалистов высокочувствительных и специфичных способов диагностики. Целью данной работы было разработка протокола полимеразной цепной реакции (ПЦР) и определение возможности его использования для изучение видового разнообразия микоплазм ассоциированных с маститами крупного рогатого скота (КРС). В результате исследований были подобраны специфичные праймеры к роду Mycoplasma на нуклеотидную последовательность рибосомального оперона для «вложенной» ПЦР. Для подобранных праймеров были оптимизированы условия постановки ПЦР реакции и оптимизирован состав реакционной смеси. Оптимизированный протокол был использован для определения генетического материала микоплазм в пробах молока от коров с маститом. Последующее секвенирования ПЦР продуктов позволило определить видовую принадлежность микоплазм. Предварительные результаты показали перспективность использования примененного протокола исследований в качестве высокочувствительного способа определения патогенных микоплазм ассоциированных с маститами.