High affinity of recombinant DJ-1 (PARK7) protein to Ni-NTA

2022

Полный текст Открытый доступ: Gold Метаданные (CSL-JSON)
DOI 10.11134/btp.2.2022.5
Достоверность данных 70 средняя
Как считается эта оценка

Складывается из проверяемых признаков самой записи: есть ли у статьи DOI, сколько независимых источников подтвердили её данные, заполнены ли обязательные поля и насколько свежо последнее подтверждение. Снижают оценку расхождения между источниками и отсутствие идентификатора. Значение от 80 означает, что запись опубликована без дополнительной проверки; от 60 до 79 — что она опубликована с пониженной достоверностью и ручная проверка желательна. Запись, выверенную редактором вручную, пересчёт не опускает ниже 90. Это оценка наших данных о статье, а не оценка самой статьи.

Аннотация

The DJ-1 protein also known as Parkinson disease protein 7 (PARK7) is a glyoxalase associated with hereditary form of Parkinson's disease. Glyoxalase DJ-1 consists of 189 amino acids and has a molecular weight of 20 kDa. The physiological role of DJ-1 is unclear but recent evidence suggest that it can detoxify reactive electrophiles formed in glycolysis. Expression and purification of the recombinant DJ-1 protein in Escherichia coli revealed an abnormally high affinity of rDJ-1 for Ni-NTA, which was accompanied by a color change of Ni-NTA from blue to blue-violet. rDJ-1 formed the strong complex with Ni-NTA, which was destroyed only by 2400 mM imidazole. Experiments with the mutant DJ-1 protein containing the Cys106Ser substitution confirmed the key role of cysteine at position 106 for the formation of this complex. The discovered phenomenon shows the potential of using the DJ-1-tag as a protein tag for obtaining high-purity protein preparations and for bioanalytical applications.