High affinity of recombinant DJ-1 (PARK7) protein to Ni-NTA

2022

Толық мәтін Ашық қол жеткізу: Gold Метадеректер (CSL-JSON)
DOI 10.11134/btp.2.2022.5
Деректер сенімділігі 70 орташа
Бұл баға қалай есептеледі

Ол жазбаның өзінің тексерілетін белгілерінен құралады: мақаланың DOI-і бар ма, оның деректерін қанша тәуелсіз дереккөз растады, міндетті өрістер толтырылған ба және соңғы растау қаншалықты жаңа. Дереккөздер арасындағы алшақтық пен идентификатордың болмауы бағаны төмендетеді. 80-нен бастап мән жазбаның қосымша тексерусіз жарияланғанын, 60-тан 79-ға дейін — оның сенімділігі төмен күйде жарияланғанын және қолмен тексеру ұсынылатынын білдіреді. Редактор қолмен тексерген жазбаны қайта есептеу 90-нан төмен түсірмейді. Бұл — мақаланың өзіне емес, ол туралы деректерімізге берілген баға.

Аңдатпа

The DJ-1 protein also known as Parkinson disease protein 7 (PARK7) is a glyoxalase associated with hereditary form of Parkinson's disease. Glyoxalase DJ-1 consists of 189 amino acids and has a molecular weight of 20 kDa. The physiological role of DJ-1 is unclear but recent evidence suggest that it can detoxify reactive electrophiles formed in glycolysis. Expression and purification of the recombinant DJ-1 protein in Escherichia coli revealed an abnormally high affinity of rDJ-1 for Ni-NTA, which was accompanied by a color change of Ni-NTA from blue to blue-violet. rDJ-1 formed the strong complex with Ni-NTA, which was destroyed only by 2400 mM imidazole. Experiments with the mutant DJ-1 protein containing the Cys106Ser substitution confirmed the key role of cysteine at position 106 for the formation of this complex. The discovered phenomenon shows the potential of using the DJ-1-tag as a protein tag for obtaining high-purity protein preparations and for bioanalytical applications.