ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ПРОВЕДЕНИЯ ПЦР-АМПЛИФИКАЦИИ ГЕНА iNOS

2024

Закрытый доступ Метаданные (CSL-JSON)
DOI 10.52578/2305-9397-2024-1-1-118-128
Достоверность данных 70 средняя
Как считается эта оценка

Складывается из проверяемых признаков самой записи: есть ли у статьи DOI, сколько независимых источников подтвердили её данные, заполнены ли обязательные поля и насколько свежо последнее подтверждение. Снижают оценку расхождения между источниками и отсутствие идентификатора. Значение от 80 означает, что запись опубликована без дополнительной проверки; от 60 до 79 — что она опубликована с пониженной достоверностью и ручная проверка желательна. Запись, выверенную редактором вручную, пересчёт не опускает ниже 90. Это оценка наших данных о статье, а не оценка самой статьи.

Аннотация

В настоящее время применяют два пути повышения эффективности традиционных противолейкозных мероприятий - разработка методов эффективной ранней диагностики и использование в селекционной практике признака устойчивости к персистентному лимфоцитозу. В этой связи наиболее актуальным направлением является определение механизмов генетической устойчивости к инфекционным заболеваниям в популяции сельскохозяйственных животных. В работе изложены данные результатов сравнительной оценки трех реакционных смесей от разных производителей с оптимизацией условий проведения ПЦР-амплификации по гену iNOS. В результате сравнительной оценки трех реакционных смесей «Encyclo Plus PCR kit» (ЗАО «Евроген»), ООО «СибЭнзайм», ГК «Алкор Био» для постановки ПЦР каждый из них позволяет наработать специфический ПЦР-продукт из выделенного ДНК крупного рогатого скота. Однако полученный ПЦР-продукт имеет разное качество, и стоимость, затраченная на постановку одной пробы также различна. Самое оптимальное количество амплифицируемой нуклеиновой кислоты при 540С наблюдается с набором от производителя «Encyclo Plus PCR kit» (ЗАО «Евроген»). На электрофореграмме виден высокий выход специфичного ПЦР-продукта гена iNOS длиной 186 п.н., без образования шмеров и неспецифики. Соответственно для дальнейшего проведения ПЦР-ПДРФ анализа и определения генотипов самым оптимальным является 1-ая реакционная смесь «Encyclo Plus PCR kit» (ЗАО «Евроген»).